動(dòng)物生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室管理要點(diǎn)探討

動(dòng)物生物安全二級(jí)(ABSL-2)實(shí)驗(yàn)室適用于操作《人間傳染的病原微生物名錄》和《動(dòng)物病原微生物分類(lèi)名錄》中第三類(lèi)動(dòng)物病原微生物。在生命科學(xué)研究中，該類(lèi)病原微生物是廣大科研工作者關(guān)注焦點(diǎn)，ABSL-2實(shí)驗(yàn)室也成為目前開(kāi)展感染性項(xiàng)目使用率最高的實(shí)驗(yàn)室。

上海市公共衛(wèi)生臨床中心的ABSL-2實(shí)驗(yàn)室自2006年正式運(yùn)行至今，已具有規(guī)范、穩(wěn)定的生物安全運(yùn)行體系，充分保障相關(guān)研究工作的安全開(kāi)展。筆者根據(jù)多年來(lái)從事ABSL-2實(shí)驗(yàn)室管理工作實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，從實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)審批及實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)、設(shè)施運(yùn)行、人員、實(shí)驗(yàn)操作管理、以及應(yīng)急事件處置及防范等方面，對(duì)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)管理方面的關(guān)鍵要素進(jìn)行了歸納總結(jié)，供同行參考。

實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)審批及實(shí)驗(yàn)申請(qǐng)

目前國(guó)家對(duì)ABSL-2實(shí)驗(yàn)室的資質(zhì)審批，普遍采取屬地管理，通常是實(shí)驗(yàn)室所在地的衛(wèi)健委或農(nóng)委主管機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)備案管理與審批。在提交備案申請(qǐng)前，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)取得市科委頒發(fā)的"實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證”，具有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格;然后將申報(bào)資料提交區(qū)衛(wèi)健委或農(nóng)委主管機(jī)構(gòu)審查備案。備案通過(guò)后，ABSL-2實(shí)驗(yàn)室可開(kāi)展備案相關(guān)病原體的科研活動(dòng)。

實(shí)驗(yàn)開(kāi)展前，科研人員向所在機(jī)構(gòu)生物安全委員會(huì)遞交“ABSL-2實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動(dòng)申請(qǐng)表”申請(qǐng)審核批準(zhǔn)。委員會(huì)委員將參照《人間傳染的病原微生物名錄》或《動(dòng)物病原微生物分類(lèi)名錄》要求嚴(yán)格審核。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后，經(jīng)生物安全委員會(huì)批準(zhǔn)，申請(qǐng)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容才可以實(shí)施開(kāi)展。此外，實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)展還需要通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查。由所在機(jī)構(gòu)的動(dòng)物使用和管理委員會(huì)(IACUC)依據(jù)動(dòng)物保護(hù)、動(dòng)物福利、動(dòng)物倫理和綜合性科學(xué)評(píng)估的原則，進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)督和評(píng)估，以盡量?jī)?yōu)化技術(shù)線路和方法，減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量。

設(shè)施運(yùn)行管理

ABSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的環(huán)境參數(shù)，均參照生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范和實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫濕度自動(dòng)控制，通過(guò)傳感器顯示在控制器面板上并傳輸至中控室電腦系統(tǒng)，同時(shí)建立電視監(jiān)控系統(tǒng)及溫度異常報(bào)警系統(tǒng)，方便工作人員實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫濕度變化。照明燈具定時(shí)控制，可調(diào)光照明系統(tǒng)用于調(diào)節(jié)燈光亮度，并設(shè)定調(diào)光系統(tǒng)定時(shí)開(kāi)啟、關(guān)閉時(shí)間，保證了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)光亮度的需求。送排風(fēng)機(jī)組由組合式送排風(fēng)系統(tǒng)組成，采用一用一備自動(dòng)切換的工作模式運(yùn)行，實(shí)驗(yàn)室送風(fēng)采用經(jīng)三級(jí)空氣過(guò)濾凈化后進(jìn)入的全新風(fēng)，送風(fēng)和排風(fēng)機(jī)制通過(guò)啟停和故障連鎖控制，此外，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過(guò)調(diào)節(jié)排風(fēng)以維持室內(nèi)壓力和壓差穩(wěn)定。嚴(yán)格的壓力梯度控制，為了防止交叉感染，ABSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)氣流必須從輔助區(qū)流向防護(hù)區(qū)，最終流入核心操作間。既保護(hù)設(shè)施，又保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)人員的安全。

人員管理

資質(zhì)管理：所有進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)人員，均必須接受培訓(xùn)并通過(guò)考核持證上崗，包括“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上崗證”及“生物安全”雙證，既具備相關(guān)專業(yè)背景，又能熟練掌握動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技能。

培訓(xùn)與考核：人員培訓(xùn)按崗位分類(lèi)進(jìn)行，以崗位職責(zé)為基礎(chǔ)，制定科學(xué)規(guī)范的人員培訓(xùn)內(nèi)容和考核體系。在生物安全培訓(xùn)方面，要制定分段式培訓(xùn)計(jì)劃，從生物安全基本原理學(xué)習(xí)入手，到實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范的指導(dǎo)性實(shí)踐訓(xùn)練，再到帶教老師親自示范，一對(duì)一現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)。培訓(xùn)采用專題講座、知識(shí)競(jìng)賽、示范練習(xí)、模擬演練等理論和實(shí)踐結(jié)合的方式。培訓(xùn)結(jié)束后進(jìn)行評(píng)估，評(píng)估培訓(xùn)對(duì)象對(duì)培訓(xùn)內(nèi)容的記憶或操作執(zhí)行情況，評(píng)估培訓(xùn)對(duì)象工作中的行為變化，并建檔保存。

進(jìn)出控制：采取嚴(yán)格的門(mén)禁授權(quán)方式，課題組項(xiàng)目應(yīng)提前完成實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害性評(píng)估的申請(qǐng)審核，實(shí)驗(yàn)人員接受ABSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部培訓(xùn)，且經(jīng)考核合格后，才能被授權(quán)打開(kāi)門(mén)禁。實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前需填寫(xiě)“實(shí)驗(yàn)預(yù)約登記表”并計(jì)劃好每周實(shí)驗(yàn)時(shí)間，每次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)須認(rèn)真完成登記，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)規(guī)定的路線進(jìn)行個(gè)人防護(hù)裝備的穿戴及更換。

健康監(jiān)測(cè)：對(duì)從業(yè)人員進(jìn)行長(zhǎng)期健康監(jiān)測(cè)，留存本底血清，進(jìn)行必要的疫苗接種，每年組織體檢并建立健康檔案;及時(shí)了解工作人員的健康狀況，確保人員的職業(yè)健康和福利。

實(shí)驗(yàn)操作管理

個(gè)人防護(hù)：個(gè)人防護(hù)用品(PPE)使用是控制生物安全風(fēng)險(xiǎn)的終端措施，選擇和使用合適的PPE是避免ABSL2實(shí)驗(yàn)室感染的關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)人員在ABSL-2實(shí)驗(yàn)室中，按照不同傳播途徑疾病的預(yù)防，針對(duì)重點(diǎn)防護(hù)部位謹(jǐn)慎選擇合適的PPE，并掌握正確使用方法，加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)。實(shí)驗(yàn)室中氣溶膠傳播是實(shí)驗(yàn)人員發(fā)生獲得性感染的主要途徑之一，因此特別要加強(qiáng)呼吸防護(hù)。

規(guī)范操作：實(shí)驗(yàn)室制定完整的管理體系文件,包括管理手冊(cè)、程序文件、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、安全手冊(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與應(yīng)急預(yù)案、記錄表單等文件，實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照體系文件要求執(zhí)行，保障各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)順利開(kāi)展。

清場(chǎng)消毒：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后認(rèn)真做好清場(chǎng)工作，所有實(shí)驗(yàn)物品移出生物安全柜前都應(yīng)打包入高壓滅菌袋，并用適當(dāng)?shù)南緞?duì)滅菌袋表面消毒。動(dòng)物調(diào)動(dòng)后的IVC籠具在生物安全柜內(nèi)放入高壓滅菌袋內(nèi)，經(jīng)表面消毒后高壓鍋滅菌，然后徹底清洗。未使用完的感染性生物材料、防護(hù)區(qū)的污染材料等高壓滅菌銷(xiāo)毀，如實(shí)填寫(xiě)操作和處理記錄。最后，生物安全柜完成內(nèi)壁的消毒擦拭后繼續(xù)運(yùn)行10min，再紫外燈消毒15 min，然后關(guān)閉。一個(gè)實(shí)驗(yàn)周期后，實(shí)驗(yàn)室可用過(guò)氧化氫對(duì)空間進(jìn)行熏蒸滅菌消毒，48h后開(kāi)啟實(shí)驗(yàn)室送排風(fēng)系統(tǒng)，空置1周后做沉降菌濃度檢測(cè)，后續(xù)重新投入使用。

應(yīng)急事件處置及防范

預(yù)案制定、組織應(yīng)急演練、緊急事件處置三個(gè)環(huán)節(jié)，是缺一不可的三個(gè)核心環(huán)節(jié)。應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)活動(dòng)種類(lèi)、設(shè)施設(shè)備狀況、人員能力現(xiàn)狀和管理體系文件的執(zhí)行情況，制定生物安全事故應(yīng)急防控預(yù)案;預(yù)案要適合本實(shí)驗(yàn)室的特點(diǎn)，具有可操作性。每年定期安排相關(guān)人員應(yīng)急演練培訓(xùn)，熟悉意外發(fā)生后正確有效處置。一旦發(fā)生緊急事件，立即啟動(dòng)應(yīng)急處置程序：首先處理好菌毒種及感染性樣品，并做好現(xiàn)場(chǎng)消毒、滅菌處理，嚴(yán)防病原微生物擴(kuò)散，并按照程序及時(shí)進(jìn)行事故上報(bào)和處置。所有人員必須嚴(yán)格按照應(yīng)急預(yù)案以及相關(guān)操作規(guī)程進(jìn)行處理，以人身安全為第一原則。一旦發(fā)現(xiàn)工作人員出現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)相關(guān)病原微生物感染類(lèi)似的臨床癥狀，應(yīng)立即匯報(bào)實(shí)驗(yàn)室主任，并向生物安全委員會(huì)及單位負(fù)責(zé)人報(bào)告，按流程啟動(dòng)相關(guān)應(yīng)急處理方案，同時(shí)派專人陪同及時(shí)就診。

展望

進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，完善生物安全管理體系。生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是ABSL-2實(shí)驗(yàn)室管理核心內(nèi)容，根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，細(xì)化安全防范制度和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，進(jìn)一步采取相應(yīng)的防范措施，提高生物安全防護(hù)水平。不斷完善科學(xué)、有效的生物安全管理體系，加強(qiáng)生物安全管理體系運(yùn)行。同時(shí)需強(qiáng)化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)生物安全相關(guān)前沿科技的交流學(xué)習(xí)，進(jìn)一步提高動(dòng)物生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室的保障水平;提供ABSL2共享平臺(tái)，確保相關(guān)科研活動(dòng)的規(guī)范開(kāi)展，為相關(guān)科研攻關(guān)任務(wù)保駕護(hù)航。

來(lái)源：未來(lái)實(shí)驗(yàn)室學(xué)苑

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